寡核苷酸定点诱变是一种在DNA特定位置引入预定突变的分子生物学技术，由Zoller和Smith于1982年发表，其核心是利用含有突变序列的寡核苷酸作为引物，在单链DNA模板上进行复制，从而获得定点突变的DNA分子 。加拿大化学家Michael Smith因对该技术的建立做出贡献而获得1993年诺贝尔化学奖 。
该技术自创立以来不断改进，例如Thomas Kunkel针对突变效率低的问题进行了优化 。现代技术已发展出如GeneArt定点突变系统等高效方法，可进行碱基替换、插入或删除，突变效率高于90% 。该技术广泛应用于研究蛋白质结构与功能、改造表达载体及引入新酶切位点等领域 。
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